上海起发为System Biosciences特约经销商，System Biosciences,简称SBI，美国加州湾区新成立的生技公司，致力于*、创新生物技术之开发，以研发利于基因及蛋白质功能鉴定、研究之崭新方法和工具为宗旨。 现阶段研发重心为RNA干扰（RNAi）研究之相关工具。 System Biosciences (SBI) 致力于开发*、革新的技术，为客户研究蛋白组学和基因组学功能提供研究工具。SBI 是专业的慢病毒产品公司，提供基于慢病毒的所有相关产品、质粒、试剂盒及相关配套试剂和慢病毒延伸产品如IPS细胞多功能性诱导试剂盒和RNAi筛选文库。
SBI AAV100A-1说明书 
品牌：System Biosciences
货号：AAV100A-1 （100 mL） /AAV110A-1 （250 mL）
简化基因治疗开发和其他基于AAV的应用
通过简单的一步式方案将AAV颗粒从培养基中集中，您可以简化您的基因治疗开发和其他依赖于AAV转导的项目。
与传统的AAV分离方法相比，这种分离方法劳动强度大，需要多步骤，需要进行细胞裂解，CsCl 2密度梯度超速离心和色谱分析，而SBI的AAVanced TM浓缩试剂可以在一个简单的步骤中从培养基中分离出rAAV颗粒。只需将AAVanced Concentration Reagent加入含有AAV颗粒的培养基中，在4°C孵育过夜，然后在1,500 g下旋转30分钟。洗一次沉淀，再旋转三分钟，然后重新悬浮并分装浓缩的病毒。分离的AAV颗粒的滴度与用传统方法分离的AAV颗粒的滴度相似（图1）。
图1. AAVanced Concentration Reagent提供的AAV颗粒制剂具有与使用常规方法制备的AAV颗粒相似的滴度。用PGK-GFP表达穿梭载体包装rAAV。rAAV颗粒从包装细胞培养基中分离，或者通过常规方法 - 细胞裂解 - 密度梯度超速离心冻融 - 或者用AAVanced Concentration Reagent。然后将等量的rAAV加入到HEK293细胞中以测试基于GFP表达的感染性。感染后10天的GFP表达细胞的代表性图像显示相似水平的感染性。
提供简化的基因治疗和其他AAV项目的简化工作流程
用AAVanced Concentration Reagent分离的rAAV显示高滴度
Figure 2. rAAV particles isolated using AAVanced Concentration Reagent are present at high copy numbers in 293T cells. A small volume of the rAAV virus isolated using AAVanced Concentration Reagent was used to infect 3×105 293T cells in a 24-well culture dish. The cells were imaged after 72-hours and rAAV copy numbers quantitated by qPCR. The copy numbers measured for the PGK-GFP rAAV virus were quite high at 2×1013 copies/mL.
Figure 3. AAVanced Concentration Reagent works with multiple serotypes in vitro. The same rAAV shuttle vector with a PGK promoter driving GFP expression was packaged in parallel into three different AAV serotypes: AAV-2, AAV-DJ and AAV-5. After 48-hours, media was collected and rAAV particles isolated using the AAVanced Concentration Reagent. Each rAAV particle pellet was resuspended in 100 mL of sterile PBS, and then 1 mL of the rAAV suspensions were added to three different cell lines (HEK293T, HT1080 and CHO) to validate transduction efficiencies. The infected cells were imaged for GFP expression 6-days after addition of the isolated rAAV particles. All serotypes of rAAV were able to infect the three different cell types tested, demonstrating the broad compatibility of AAVanced Concentration Reagent.
Figure 4. rAAV particles isolated using AAVanced Concentration Reagent work in vivo. (Upper panels) Representative images of hippocampal and midbrain sections from 6-week old C57 mice injected with AAV virus (ITR-PGK-GFP-ITR) concentrated using AAVanced Concentration Reagent. Approximay 1.5 µl of concentrated AAV virus (AAV-2 serotype) was delivered to hippocampal and midbrain regions by stereotaxic injection. Three weeks after virus injection, the animals were perfused with paraformaldehyde, fixed, and brains specimen were sectioned to 40 micron slices before imaging. The presence of robust GFP expression demonstrates successful delivery of the rAAV vector.
(Lower panels)使用AAVanced Concentration Reagent浓缩注射了AAV-5病毒（ITR-PGK-GFP-ITR）的2月龄C57小鼠的海马中的小鼠CA3神经元的切片的代表性图像。通过立体定位注射将约1.5μl浓缩的rAAV-5病毒递送至皮质区域。病毒注射后两周，动物用多聚甲醛灌注，固定，在成像前将脑切成70微米切片。强大的GFP表达的存在表明rAAV载体的成功递送。
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