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QA-bio E-PNG01 说明书

 发布时间:2017/10/19 点击量:631

世界*实验材料供应商QA-Bio 正式授权上海起发为其中国代理,QA-Bio  在一直是行业的*,一直为广大科研客户提供zui为的产品和服务,上海起发一直秉承为中国科研客户带来的产品,的服务, 签约QA-Bio  就是为了给广大科研客户带来更加完善的产品和服务,您的满意将是我们zui大的收获

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QA-bio公司是一家致力于提供糖基化研究工具的专业公司,所提供的糖基化研究产品涵盖糖苷内/外切酶,去糖基化酶,唾液酸产品,多糖产品纯化试剂盒,多糖标记试剂盒,HPLC柱及其缓冲液,同时公司还提供多糖分析服务。此外,公司还提供部分分子生物学产品。

 

产品线:

碳水化合物分析用的酶
    聚糖标准品
    糖纯化
    Ludger Tag聚糖标记试剂盒
    糖生物学用HPLC色谱柱
    糖测序试剂盒

去糖基化试剂盒
    MS / MS数据分析工具

 

PNGase F

PNGase F从糖蛋白切割N-连接(天冬酰胺连接)寡糖。

0.3单位/ 60 uL 
包括酶,缓冲液,变性剂和Triton-X。

货号: E-PNG01

肽N糖苷酶F,N-糖苷酶,PNGase F

PNGase F从糖蛋白切割N-连接(天冬酰胺连接)寡糖。PNGase F将天冬酰胺分解成天冬氨酸,保留寡糖。变性会使裂解率提高到100倍。大多数天然蛋白质仍然可以*N-去糖基化,但是孵育时间必须增加。PNGase F将在孵育条件下保持活性至少72小时。PNGase F不会去除在植物糖蛋白上通常发现的含有α-(1,3)连接的核心岩藻糖的寡糖; 为此,使用肽N-糖苷酶A.

来源 Elizabethkingia miricola(是Chryseobacterium meningosepticum

EC 3.5.1.52

内容物将
60μl等份的PNGase F(0.3U)在20mM Tris-HCl,pH7.5中

5×反应缓冲液7.5,用于PNGase F - 250mM磷酸钠,pH7.5

变性溶液 - 2%SDS,1Mβ-巯基乙醇

Triton X-100 - 15%溶液

比活性 > 25 U / mg

活性 5 U / ml

分子量 36,000道尔顿

PNGase F 6-10的pH范围,*7.5

PNGase F建议用法
1.加入200μg糖蛋白至Eppendorf管。用去离子水调节至35μl终体积。
2.加入10μl5x PNGase F反应缓冲液7.5和2.5μlPNGase F变性溶液。在100°C下加热5分钟。
酷。加入2.5μlPNGase F Triton X-100并混合。
4.向反应物中加入2.0μlPNGase F。在37°C孵育3小时。

特异性切除所有天冬酰胺连接的复合物,高甘露糖寡糖,除非alpha(1-3)核心岩藻糖基化; 天冬酰胺必须在两个末端都有肽键,Endo F自由

比活性定义为在37℃,pH7.5下在1分钟内催化从1微摩尔变性的BSA和RNA酶B中释放N-连接的寡糖所需的酶量。裂解通过SDS-PAGE(切割的RNA酶B迁移更快)来监测。

储存酶在4°C。

PNGase F参考

- 拜耳,EA,F. De Meester,T. Kulik和M. Wilchek。去糖基化蛋白抗生物素蛋白的制备 Appl Biochem Biotech 53: 1-9(1995)

- 长老,JH和S.亚历山大。内切-BN-乙酰氨基葡萄糖苷酶F:来自脑膜炎杆菌的内切糖苷酶,其切割高甘露糖和复合糖蛋白。Proc Natl Acad Sci USA 79: 4540-4544(1982)

- Tarentino,A .L.,CMGomez和TH Plummer,Jr.Depososylation of asparagine-linked glycans by peptide:N-glycosidaseF.Biochemistry 24: 4665-4671(1985)

- Tarentino AL和TH Plummer。天冬酰胺连接的聚糖的酶解脱糖基化:来自脑膜炎黄杆菌的寡糖切割酶的纯化,性质和特异性。Meth Enzymol 230: 44-57(1994)

- Trimble RB和AL Tarentino。鉴定脑膜炎黄杆菌中不同的糖苷内切酶(endo)活性:内源F1,endo F2和endo F3。Endo F1和endo H仅水解高甘露糖和杂聚糖。J Biol Chem 266: 1646-1651(1991)

- Taga,EM,A. Waheed和RL Van Etten。来自杏仁的均一肽-N-糖苷酶的结构和化学表征。Biochemistry 23: 815-22(1984)

 

 

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