scarabgenomics CRM197说明书

• 以经济的价格高纯度CRM197 -金龟子的rCRM197是在我们的基因组清洁表达^® 大肠杆菌，通过删除基因组> 20％，可实现完整的超洁净的蛋白质通过生物工程。由于几乎所有Scarab的CRM197都完好无损，因此您的半抗原不会浪费。
• 生物仿制药天然CRM197 -的氨基酸序列，质谱法，圆二色性，分析所有指示金龟子在我们的基因组清洁制成重组CRM197 ^®大肠杆菌相当于CRM197。
• 共轭准备 - Scarab的CRM197结合能力已通过定量功能测定证实
• 超低内毒素 - Scarab的工程化清洁基因组^® 大肠杆菌具有简化的内毒素，比标准表达菌株更容易去除。

背景

交叉反应材料197（CRM197）是一种基因无毒形式的白喉毒素（DT）。CRM197中的单碱基变化（位置52处的谷氨酸至甘氨酸）使A链的ADP-核糖基化活性失效，减弱毒性^1,2。尽管CRM197是无毒的，但它在免疫学上与白喉毒素无法区分。CRM197作为多糖和半抗原的载体起作用，使其在许多结合疫苗中具有免疫原性。

圣甲虫基因组学CRM197是重组形式的清洁基因表达^® 大肠杆菌，我们的专有平台。

SOURCE
清洁基因组^® 大肠杆菌中表达的重组CRM197

产品分子量： 58.4 kDa

数据

图1：Scarab Genomics的CRM197非常纯净，并且在批次之间保持一致。每批Scarab的CRM197的五个重复在Bis-Tris 4-12％梯度SDS聚丙烯酰胺凝胶上运行并用GelCode TM Blue染色，然后通过凝胶扫描评估纯度。计算每批的平均纯度并如下分配：图A纯度98.3％，图B纯度95.5％。

图2：Scarab Genomics的CRM197纯度高于其他商业来源。将来自每种来源的2微克CRM197在Bis-Tris 4-12％梯度SDS聚丙烯酰胺凝胶上电泳并用GelCode TM Blue染色。Scarab产品中几乎不存在分解产物（表示为A和B带）。一些泳道中的被涂污的背景是由于蛋白质降解和宿主蛋白质的，两者在Scarab产品中都是小的。泳道1大小标记，泳道2空泳道3 Scarab Genomics CRM197，SG1泳道4 Scarab Genomics CRM197，SG2，Lane 5供应商F，泳道6供应商M和泳道7供应商L.

图3：Scarab CRM197的LC MS肽图谱证实它与原生CRM197具有生物学相似性。在Scarab的高纯度CRM197上进行氨基酸测序和质谱（MS）。MS材料的广泛生物信息学分析显示没有翻译后修饰。胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶消化后接着纳米液相色谱-MS / MS鉴定出非常高的蛋白质覆盖率（~97-98％）。Scarab CRM197上的电喷雾电离质谱（ESI-MS）证实了预期的肽序列。没有观察到与报道的氨基酸组成和侧链修饰的差异。

图4：圣甲虫的CRM197结合有效。并非CRM197中的所有赖氨酸都暴露在蛋白质表面上以进行潜在的缀合。采用Solulink的ChromaLink™生物素结合测定（San Diego，CA），利用NHS酯反应方案将生物素与伯胺结合，我们证实Scarab的CRM197上至少有10个位点可用于结合。这种光学定量（在354nm处的吸光度）功能测试证实，Scarab的CRM197上的赖氨酸可与半抗原结合，如天然CRM197。

产品规格

质量控制

等级： CRM197仅供研究使用，不适用于人类或诊断代理。

储藏条件：

• CRM197是0.2μm过滤的4mg / mL CRM197,150mM NaCl，25mM HEPES，pH7.4的冷冻溶液。收到后储存在-70°C。
• 为了使聚集小化，将CRM197在37°C水浴中解冻1小时。
• 重复的冻融循环会降解材料。为了大限度地减少冻融循环，将CRM197等分以匹配所需的用途。
• 轻轻处理产品，不要VORTEX。

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